covalent attachment of tags to capture histones and identify turnover(CATCH-IT) 共价连接标记捕获组蛋白并确定转换
共价连接标记捕获组蛋白并确定转换是一种核小体的解离-重新组合(即转换,turnover)的实时捕捉新技术。以黑腹果蝇S2细胞为研究对象,技术流程如下:用甲硫氨酸(Met)的替代氨基酸azidohomoalanine(Aha)处理S2细胞,当组蛋白翻译时Aha即可掺入新合成的组蛋白中;用生物素(biotin)连接Aha,这样发生新转换的核小体就会被生物素标记;将染色质裂解为单个核小体,用抗生蛋白链菌素(streptavidin)磁珠提取生物素标记的刚发生转换(新合成)的核小体;将这些核小体上的DNA链和高密度的基因芯片杂交,获得这些DNA的信息。从而得知哪些DNA区段上的核小体发生了新的解离-合成过程。